如何养出一盘饱满漂亮的细胞

     临近开学，我司技术支持（兼心理辅导师）经常收到这样焦虑的问题：“ 老si，你好，如何才能收获一盘漂亮的细胞呢？为啥别人家的细胞养得那么好呢，我的就一言难尽呢”养出漂亮细胞 这个事儿本就说来话长~之前讲过细胞贴壁、老化、成团、冻存、复苏、污染等问题 。这次小编又整理了一遍，先看看这些基本点是否都做好了

了解细胞生长习性 
不同的细胞生长习性不同，了解细胞生长习性，正确计数，才能掌握好传代密度。对于一般细胞株，控制在三天一传，是比较合适的，细胞不会太挤也不会太寂寞。但例如癌细胞，一发起疯来半天就可以传代，不及时换液或扩增分分钟会饿死或挤死。
所以刚开始接触一款细胞，要勤观察，及时掌握它的生长情况。掌握细胞的生长节奏之后可以变成一天一看或两天三看，毕竟太频繁的把它从培养箱里拿出来也不太好。
 

对大部分细胞消化来说，可以在消化到差不多快要脱落的时候，移除大部分胰酶，然后直接加新鲜的培养基将细胞吹打下来，省去离心步骤。残余的胰酶含量很低，所以不会对细胞产生任何影响。
对于难消化的细胞，如HCT15, LS411和KM12，用不含Ca²⁺、Mg²⁺的PBS洗涤一次后，加入稍微多一点胰酶，置37ºC彻底消化(一般为几分钟)至脱落（一晃细胞就掉下来），然后再加含血清的培养基终止胰酶反应、离心 (若是无血清培养基，需改加胰酶抑制剂)。这么做的道理是，细胞消化不彻底，势必会增加吹打辅助脱落的次数，而吹打次数越多，细胞活性越差。