酵母菌菌株的保存培养与复苏实验

酵母菌菌株的保存与复苏实验

实验材料 酵母菌

试剂、试剂盒 甘油DMSO

仪器、耗材 冻存管

实验步骤

1.  配制30%的甘油溶液，在每个15 mm×45 mm，4 ml 的带盖的冻存管中加入1 ml 甘油溶液，轻轻拧上螺盖，高压灭菌15 min。

2.  为了在冻存管中配制冻存菌液，加入1 ml 对数后期或静止早期的培养液，混匀后置干冰中一段时间，然后转存到-70℃冰箱中。

3.  复苏菌株时，可以从冻存管中刮下少量细胞划在平板上，不要将整个冻存管中的贮存液融化。

4.  细胞也可以按菌悬液加入80 μl DMOS的方式配制冻存菌株，贮存在-70℃。

酵母菌培养实验

实验材料 酵母菌

试剂、试剂盒 葡萄糖

仪器、耗材 摇床锥形瓶离心机

实验步骤

1.  在30℃，氧气充足和以葡萄糖作碳源的条件下，野生型酿酒酵母菌生长得十分良好。当酵母菌在试管中培养时，接种酵母菌贮液后应轻轻振荡培养液以便菌体细胞分散均匀。

2.  在作大体积液体培养时，酵母菌在锥形瓶中生长较好，使用瓶底具隔板的烧瓶增加进氧量更有利于酵母菌的生长。

3.  培养酵母菌时很重要的一点就是要保证所有玻璃器皿无任何表面活性剂。还要保持良好的通气条件，培养液不应超过整个烧瓶总体积的1/5，而且置于300 r/min，30℃恒温摇床中进行培养。

4.  对于小量制备DNA和RNA，酵母菌可用玻璃或塑料试管培养，在试管中加入三分之一体积的培养基，并固定在摇床平台上，于350  r/min 转速振荡培养。