O157显色培养基检验原理

产品名称：O157显色培养基
英文名称：O157 chromogenic medium
供应商：远慕生物
规格： 100g
保质期：三年
用途：用于O157菌的显色培养，O157菌显亮红色、淡红色或红色
备注：需添加CT添加剂

简介：大肠杆菌O157：H7显色培养基用于食品、病人粪便样品中O157：H7菌的快速检测。O157：H7菌显亮红色、淡红色或红色，菌落周围没有蓝色晕圈，大肠杆菌和大肠菌群显暗蓝色、蓝色或紫色，菌落周围有蓝色晕圈；其它细菌显蓝色、黄色或无色。本培养基的特异性高，可以克服SMAC培养基引起的假阳性和假阴性结果，是一种很理想的快速检测培养基。

成份(g/L)
特殊营养物质 68.4
混合显色剂  2.6
琼脂 15.0
pH7.0±0.1  25℃ 
CT添加剂  1ml/支*5（已配套，无需另购）
此配方可以进行改良或增加营养成份以获得最/佳的结果。

用法
称取本品 17.2g 加入 200ml 蒸馏水，加热煮沸溶解并不停搅拌，加热 2 分钟左右。冷却至 45-50℃ 时，加入一支CT添加剂混匀，倾入无菌平皿。
注意：制备好的培养基一定要保持表面干燥，可在 36℃ 的培养箱中倒置放置 1-2 小时。

原理
利用大肠杆菌O157 自身代谢产生的酶与相应显色底物反应使菌落显色，以区分目标菌与非目标菌。显色底物是由产色因子和微生物部分可代谢物质组成，在特异性酶作用下，游离出产色因子使菌落显示一定颜色。

操作步骤
1、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液；
2、取 25 克样品液加入 225ml  mEC肉汤或mTSB肉汤中，36℃ 增菌培养 18-24 小时；
3、用 3mm 接种环取 1 环增菌液，划线接种到O157菌显色培养基上，做 2 个平板；
4、36℃ 培养 18-24h，O157:H7菌显亮红色、淡红色或红色，菌落周围没有蓝色晕圈；大肠杆菌和大肠菌群显暗蓝色、蓝色或紫色，菌落周围有蓝色晕圈；其它细菌显蓝色、黄色或无色；
5、对典型菌落可做O157:H7菌血清学试验和全套生化试验。
注：必须在 36℃ 培养 24 小时内判读结果，以免菌落颜色发生变化。

质量控制
1、外观
此干燥培养基的粉末均匀，具有良好的流动性，呈灰白色。制备好的平板呈蓝色固体培养基。
2、微生物试验
在 36℃ 培养 18-24h 小时：

质控菌株	ATCC	生长情况	菌落颜色
大肠杆菌O157	35150	+++	亮红色
金黄色葡萄球菌	25923	-/+	黄色或无色
大肠杆菌	25922	+/-	暗蓝色，菌落周围有蓝色晕圈
沙门氏菌	14028	+++	蓝色
奇异变形杆菌	12453	+/-	无色
肺炎克雷伯氏菌	10031	+/-	蓝色，菌落周围有蓝色晕圈
弗氏柠檬酸盐杆菌	43864	+/-	蓝色菌落有紫色中心，菌落周围有蓝色晕圈
坂崎杆菌	29004	++	紫色至蓝色

方法的局限性
本培养基上的典型大肠杆菌O157:H7必须做血清学试验或生化试验。

典型特征
典型大肠杆菌O157:H7菌显亮红色、淡红色或红色，菌落周围没有蓝色晕圈；大肠杆菌和大肠菌群显蓝色或紫色，菌落周围有蓝色晕圈；其它细菌显蓝色、黄色或无色；

贮存
制备好的平板可保存 2-5 天，应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处， 保存温度 2-8℃，注意避光保存。

失效
干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。

注意
此培养基仅供实验室使用。