油红O染色液(培养细胞专用)操作步骤

产品名称：油红O染色液(培养细胞专用)
英文名称：Oil Red O stain kit(For Cultured Cells)
储存条件：2-8℃，避光，有效期6个月
单位：瓶
规格：4*20ml 4*50ml

简介：脂质(Lipid)是中性脂肪、类脂及其衍生物的总称，其共同的物理特性是不溶于水，易溶于有机溶剂(如乙醇、乙醚等)。人体的脂肪主要有两种：1、储存脂肪，如中性脂肪，主要分布于皮下、肾、胰腺等部位。2、结构脂肪，如类脂(磷脂、糖脂、胆固醇等)，主要分布于细胞内。中性脂肪(Neutral fat)是由三分子脂肪酸和一分子甘油组成的脂类，呈中性。中性脂肪是储存能量的方式之一，在氧化时释放出能量。中性脂肪染色经常采用苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ、苏丹黑B、油红O法等。传统方法采用苏丹染料，最近发现偶氮染料油红O更适合脂肪的染色。油红O是很强的脂溶剂和染脂剂，较易不甘油三脂结合呈小脂滴状，不磷脂结合力稍差，其染色原理一般认为是物理上的溶液作用或吸附作用，借溶液作用使脂肪染色。染料在细胞内脂质的溶解度较原溶剂中的溶解度更大，所以在染色时染料就从有机溶剂转移入脂质而使脂肪染色。

油红O染色液(细胞专用)简称ORO染色液，可显示最小的脂滴，可优先为脂类从溶剂中吸附染料。标本不采用含有乙醇的固定液，如需要固定可采用10%福尔马林)。脂肪阳性染色结果呈橘黄至红色，但具体颜色因脂质浓度而定。

使用方法
1、培养好的细胞样品固定于CellOROFixative15-25min。
2、PBS缓冲液或生理盐水稍冲洗，稍晾干。
3、(可选)60%异丙醇滴洗20～30s。
4、滴加油红O染色液，密闭染色10～15min。
5、分色:入60%异丙醇稍洗以便去除染液。
6、PBS缓冲液或生理盐水稍冲洗。
7、入Mayer苏木素染色液，复染核1～2min。
8、(可选)入OROBuffer1min。
9、晾干，镜检。

染色结果：
中性脂肪  橙红色或橘红色
细胞核   蓝色

注意事项：
1、ORO染色液不够稳定，易产生沉淀，不宜提前配制。
2、Mayer苏木素染色液复染时间不能过长。
3、染色结果不能长期保存，应尽快观察及照相。
4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。