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植物组培的操作技术:生根培养

2019-04-02 10:56 作者:洛辰 来源:上海远慕生物试剂
     当材料增殖到一定数量后,就要使部分培养物分流到生根培养阶段。若不能及时将培养物转到生根培养基上,就会使久不转移的苗子发黄老化,或因过分拥挤而使无效苗增多造成抛弃浪费。因此生根培养是使无根苗生根的过程。最后要使生出的不定根浓密而粗壮。生根可采用1/2或者1/4MS培养基,全部去掉细胞分裂素,并加入适量的生长素(NAA、IBA等)。
   用下列方法诱导生根(1)将新梢基部浸入50或100ppm IBA溶液中处理4~8小时。(2)在含有生长素的培养基中培养4~6天。(3)直接移入含有生长素的生根培养基中。上述三种方法均能诱导新梢生根。但前二种方法对新生根的生长发育更有利。而第三种对幼根的生长有抑制作用。因为当根原始体形成后较高浓度生长素的继续存在,则不利于幼根的生长发育。但这种方法比较可行。
    有时采用下列方法就可生根。(1)延长在增殖培养基中的培养时间。(2)有意降低一些增殖倍率,减少细胞分裂素的用量(即将增殖与生根合并为一步)。(3)切割粗壮的嫩枝在营养钵中直接生根,即没有生根阶段。第三种方法省去了一次培养基制作。切割下的插穗可用生长素溶液浸蘸处理,但这往往适于一些容易生根的作物。
  少数植物生根比较困难的,需要在培养基中放置滤纸桥,使其略高于液面,靠滤纸的吸水性供应水和营养等,从而诱发生根。
    从胚状体发育成的小苗,常常有原先即已分化的根,可以不经诱导生根阶段。但因经胚状体途径发育的苗数特别多,且个体较小,所以也常需要一个低浓度或没有植物激素的培养基培养的阶段,以便壮苗生根。
    试管内生根壮苗的阶段,目的是为了成功地移植到试管外的环境中,使试管苗适应外界的环境因子。不同植物的适宜驯化温度不同。如菊花,以18~20C为宜。温度过高牵涉到蒸腾加强。以及菌类易滋生等问题。温度过低使幼苗生长迟缓,或不易成活.春季低温时苗床可加设电热线使基质温度略高于气温2~3C,这利于生根和促进根系发达,有利于提前成活。
    光强应比以前培养有所提高。以强度较高的漫射光为好,约4000Lx左右为宜,以维持光合作用所需光强。但光线过强刺激蒸腾加强,使水分平衡的矛盾更尖锐。
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