影响酶促反应的因素--温度、PH和抑制剂

酶的zui适温度不是一个常数，与作用时间长短有关。测定酶活性均在酶促反应zui适温度下进行。大多数动物来源的酶zui适温度为37-40℃，植物来源的酶zui适温度为50-60℃。

酶的催化活性与环境PH有密切关系，通常各种酶只在一定PH范围内具有活性，酶活性zui高时的PH，称为酶的zui适PH。高于或低于此PH时酶的活性逐渐降低。

酶的zui适PH不是一个特征物理常数，对于同一个酶，其zui适PH因缓冲液和底物的性质不同而又差异。

在酶促反应过程中，抑制对酶的抑制作用可分为可逆抑制和不可逆抑制。可逆抑制有根据抑制剂和底物的关系分为三种类型；竞争性抑制，非竞争性抑制和反竞争性抑制。

实例如下：

一、试剂

5%三氯醋酸溶液。1mmol/L苯甲脒；称取19.25g苯甲脒，用少量水溶解，定容至100ml。

1%酪蛋白溶液；取1g酪蛋白，加0.1mol/L氢氧化钠溶液10ml、水40ml，置60℃水浴加入至溶解，放置室温后，加水稀释成100ml，并调至PH8.0.

0.1mol/L硼酸缓冲液；

A液，0.1mol/L硼酸（H2BO3)；称取6.18gH3BO3溶于1000mL水中。

B液，0.025mol/L硼砂（Na2B4O7·10H2O);

称取9.54g硼砂（Na2B4O7·10H2O）溶液1000ml水中。

PH7.4硼酸缓冲液；90ml A液+10ml B液

PH8.0硼酸缓冲液；70ml A液+30ml B液

PH9.0硼酸缓冲液；20ml A液+80ml B液、

材料

酪蛋白酶溶液：50-200ug/ml，用0.1mol/L,PH8.0硼酸缓冲液配制。可用粗提的猪胰蛋白酶，用量根据实际测得比活值而定。

仪器：

试管1.5cm x15cm（x19);移液管1ml（x7），2mL(x3)，5mL(x5);量筒100mL（x1），恒温水浴（0℃）；白瓷板；胶头滴管。

操作方法；

温度对酶活力的影响