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产品名称:

Triton-NH4OH细胞裂解液

 
产品编号: PR0124819 
供应商: 远慕生化试剂厂家 
储存方式: 4℃ 
保质期: 12个月 
用途: 裂解缓冲液 
Triton-NH4OH细胞裂解液
Triton-NH4OH细胞裂解液的使用方法,注意事项,简介,信息说明等详情由上海远慕生化试剂厂家提供详细介绍,本司供应的裂解液产品非常多,主要有:RIPA裂解液(中),RIPA裂解液(强),RIPA裂解液(弱),NP-40裂解液,SDS裂解液,Triton X-100细胞裂解液,Triton-SDS细胞裂解液,Western及IP细胞裂解液(无抑制剂)及其他类,本司所供应的裂解液品种齐全,价格实惠,欢迎订购!
 
【Triton-NH4OH细胞裂解液】使用方法_注意事项_自备材料_简介
【Triton-NH4OH细胞裂解液】自备材料_简介信息

【信息说明】

产品名称:Triton-NH4OH细胞裂解液

规格:100ml/500ml

供应商:远慕生化试剂厂家

分类:细胞组分分离

储存条件:4℃,12个月

用途:裂解缓冲液

主要成分:无菌溶液。主要由0.5% Triton X-100、20mM NH4OH、PBS组成。


【自备材料】

1、胰蛋白酶

2、离心机

3、PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液

4、胎牛血清


【使用方法】

A、组织细胞样本的常规操作

1、制备细胞悬液: 新鲜组织经过胰蛋白酶或胶原酶等消化处理,通过适当方法制备成细胞悬液,离心弃上清。

2、裂解:加入3~5倍细胞沉淀体积的Triton-NH4OH Lysis Buffer,轻柔吹打混匀,裂解。本操作步骤在4℃条件下操作更佳,亦可在室温下操作。

3、离心: 4℃,离心5min,弃红色上清。如无低温离心机,本步骤亦可在室温下操作。

4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3各一次。

5、洗涤:根据实验要求加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀重悬沉淀。4℃,离心2~3min,弃上清,该离心步骤亦可在室温下操作。所加入的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液的量一般应大于细胞沉淀体积的5倍以上。

6、如有必要,重复上述步骤5一次,共洗涤1~2次。

7、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀,进行计数、培养等后续实验。

B、血液样本的常规操作

1、取新鲜抗凝血,离心5min,弃上清。

2、 裂解:加入6~10倍细胞沉淀体积的Triton-NH4OH Lysis Buffer,轻柔吹打混匀,裂解。本操作步骤在4℃条件下操作更佳,亦可在室温下操作。

3、离心:4℃,400~500g离心5min,弃红色上清。如无低温离心机,本步骤亦可在室温下操作。

4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3一次。

5、洗涤: 根据实验要求加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀重悬沉淀。4℃,离心2~3min,弃上清,该离心步骤亦可在室温下操作。所加入的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液的量一般应大于细胞沉淀体积的5倍以上。

6、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀,进行计数、培养等后续实验。

注意: 对于微量或少量的血液样本,可以不用第1步操作,可直接加入10倍血液体积的Triton-NH4OH Lysis Buffer进行第2步操作,并在4℃或室温裂解4~15min。

【Triton-NH4OH细胞裂解液】使用方法_注意事项
Triton-NH4OH细胞裂解液


【注意事项】

1、制备细胞悬液时应根据实验需要,不一定要制备成单细胞悬液。

2、后续试验如果是用于细胞培养,操作过程中应注意无菌操作,尽量在超净工作台内操作。

3、离心步骤尽量在4℃离心机上操作。

4、常规步骤与快速步骤的区别在于:常规步骤多了一步洗涤过程的离心,可以节省洗涤液的用量,并且洗涤效果也更好,不需要大体积的离心管;快速步骤少了一次离心过程,洗涤效果略差一些,同时需要大体积的离心管。

5、离心洗涤后,通常极微量的红细胞不会影响后续的检测。

6、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


【简介说明】

在生物科研领域,经常需要去除红细胞,去除红细胞的方法有多种,如ACK Lysis Buffer、Tris-氯化铵红细胞裂解液、Gey's Lysis Buffer。Leagene Triton-NH4OH细胞裂解液(Triton-NH4OH Lysis Buffer)经过优化配方,在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(Lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。本裂解液经过滤除菌,经过Triton-NH4OH Lysis Buffer处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。

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标签:Triton-NH4OH细胞裂解液


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