肥大细胞染色液(甲苯胺蓝法)

肥大细胞染色液(甲苯胺蓝法)操作步骤：
1.取新鲜组织立即固定于10%中性福尔马林固定液中，常规脱水包埋；
2.切片厚度4-5μm，常规脱蜡至水；
3.系列乙醇，自来水洗；
4.入ToluidineBlueOStain，浸染1；
5.自来水稍洗；
6.TBO分化液分化，直至细胞核和颗粒清晰，可在显微镜下控制；
7.自来水稍洗，滤纸吸干或吹风机吹干水分；
8.95%乙醇，无水乙醇，每次；
9.二甲苯透明，中性树胶封固。

肥大细胞染色液(甲苯胺蓝法)说明：
1.肥大细胞(Mastcell)是疏松结缔组织内常见的细胞，常成群的沿着小血管和淋巴管分布，也常见于支气管和胰腺的小叶间导管周围，一般细胞较大，直径约为20-30μm，呈圆形或椭圆形，胞核较小、胞质内充满粗大且具有异染性嗜酸性颗粒。
2.甲苯胺蓝(ToluidineBlueO)中的阳离子有染色作用,组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。甲苯胺蓝还含有两个助色团，能促使染料产生电离成盐类,帮助发色团对组织产生染色力,使切片上的组织细胞着色，可染细胞核使之呈蓝色。肥大细胞颗粒呈紫红色，其他呈蓝色。

肥大细胞染色液(甲苯胺蓝法)注意事项：
1.针对于胃粘膜组织、软骨组织等较难着色组织的染色，浸染于甲苯胺蓝染色液的时间应相应延长；
2.应注意组织要新鲜，取出后立即固定；
3.甲苯胺蓝染色后不宜采用低浓度乙醇脱水，否则容易导致褪色；
4.分色后应快速入95%乙醇，无水乙醇，二甲苯的时间不宜过久，否则容易导致褪色；
5.染色程度可通过改变染色时间或染色温度做适当调整；
6.每次试剂用完后，请迅速盖好，以免挥发；
7.石炭酸对皮肤、粘膜有强列刺激性和腐蚀性，使用时请穿实验服并戴一次性手套操作。

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