刘氏染色液(Liu stain)使用说明书

刘氏染色液(Liu stain)使用说明书

品名：刘氏染色液
规格：3×100mL/3×500mL
保存：RT，避光保存。开封后请在6个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。

试剂盒组成：

规格 名称	3×100mL	3×500mL	Storage
试剂(A): Liu A Stain	100mL	500mL	RT，避光
试剂(B): Liu B Stain	2×100mL	2×500mL	RT，避光

产品介绍：
刘氏染色液是在Wright染色基础上改良而来的一种快速染色方法，是细胞学检查中常用的染色方法之一。该染色液是根据台湾大学刘祯辉教授所研究的一种新的染色技术所配制，它与瑞氏染色(Wright Stain)一样，都是利用Romanowsky Stain技术原理改良而来的，染色结果与瑞氏染色和迪夫快速染色也极其相似，但所需的时间比瑞氏染色要短，一般2min以内即可完成染色。刘氏染色液含1份刘氏A液、2份刘氏B液，分别用酸性染料(伊红)和碱性染料(亚甲蓝)等配制而成，主要用于血细胞涂片、骨髓涂片、阴道分泌物涂片、脱落细胞涂片等染色。

样本要求：
1、    血细胞涂片染色：要求新鲜全血或EDTA·K2 抗凝血。
2、    阴道分泌物（妇科白带）涂片染色：新鲜标本离开人体涂片后，需尽快以火焰或酒精固定，以避免细胞变形。
3、    骨髓涂片染色：涂片制成后，应在空气中快速摇动或扇干，防止细胞皱缩变形或因空气潮湿而溶血，绝对不能用高温或火烤。
4、    脱落细胞涂片染色：采取检体并涂片，待检涂片固定可采用自然干燥法或湿片固定液固定法(具体操作可根据不同检体及所采用的固定液所对应的规范操作要求进行)。一般情况下若采用湿片固定法，标本浸泡时间稍长些，效果会更佳。若采用湿片固定液固定标本，固定液用后需经常过滤，更换，防止细胞交叉污染。

检验方法：
一、标准方法
1、    加Liu A Solution(约0.5mL～0.8 mL)染色30 秒后。
2、    再将Liu B Solution 滴加于A 液上面(滴加之量为A 液的两倍)。以嘴或洗耳球吹出微风，使液面产生涟漪状，让两液充分混合，染色1 分30 秒～2 分钟。
3、    水洗（冲洗时不能先倒掉染液，应以流水冲去，以防有沉渣沉淀在标本上），干燥、镜检。

二、快速染色
1、    加Liu A Solution(约0.5mL～0.8 mL)后，立即将Liu B Solution 滴加于A 液上面(滴加之量为A 液的两倍)。以嘴或洗耳球吹出微风，使液面产生涟漪状，让两液充分混合，染色30 秒～1 分钟。
2、    水洗（冲洗时不能先倒掉染液，应以流水冲去，以防有沉渣沉淀在标本上），干燥、镜检。

检验结果：
血细胞涂片、骨髓涂片染色：红细胞呈淡红色，白细胞浆中颗粒清楚，并显示出各种细胞特有的色彩，细胞核染紫红色，核染色质结构清楚。
阴道分泌物（妇科白带）染色：
①滴虫：经过染色后的滴虫跟活的滴虫呈现完全不同的形态，一般情况下，看不到鞭毛。经过染色后，滴虫多为梨形、圆形、椭圆形或呈不规则形态，浆被染成灰蓝或天蓝色，核小、枣核状，常偏于一侧，需注意观察，避免与上皮细胞混淆。
②念珠菌（霉菌）：染成深蓝色，可见芽生孢子，假菌丝细长而直。
③白细胞：形态上与血细胞涂片的白细胞相同，一般白细胞的多寡，提示发炎程度的高低，对医师的诊断具有一定的指标作用。
④纤毛菌：细长如丝，灰蓝色。
⑤淋菌：蓝色，呈典型的肾形相对，多出现于白细胞、组织细胞内外。需注意女性阴道涂片常出现葡萄球菌，染色结果与淋菌相类似，也是一对一对的以双球菌方式出现，所以对淋菌的判读需十分谨慎，一般情况下，淋菌的发现多会伴随大量白细胞的出现。本染色液对淋菌的判读仅作为初检染色参考结果，不作确诊依据。
⑥加特纳球杆菌：呈蓝色、球杆状。
脱落细胞染色：细胞核染紫红色，核仁染蓝色。细胞质随着分化程序的不同，其嗜碱性程度也有变化，呈深浅不等的蓝色。

注意事项：
1、供骨髓片染色使用时：①涂片要新鲜，涂片后立即进行染色，否则细胞蛋白质变性，染色偏碱。②载玻片要洁净，手指不能触及其表面。③不能用草酸盐抗凝标本作涂片，因草酸盐可使细胞核变形，染色质致密、胞浆空泡形成，出现草酸盐结晶。④涂片一般不用抗凝剂，若作细胞计数或其他检查，可考虑用肝素抗凝，但一般量不宜太大，否则会影响细胞形态。

供妇科白带涂片及阴道\分泌物染色使用时：妇女白带病是一种常见病，使用传统盐水涂片法只能查滴虫和霉菌，而且检出率偏低。本染色液可供妇科白带涂片作为一种快速染色液进行多项检查用，可在一片白带涂片上同时作滴虫、霉菌、白细胞、纤毛菌、淋菌、加特纳球杆菌、核异质细胞、肿瘤细胞等多项初筛检查，其方法简便、时间较短、形态较清晰、检出率较高，一般5 分钟可出结果。

供脱落细胞使用时：
①脱落细胞的检体来源较广，这里所指包括子宫颈涂片、子宫内膜涂片、痰液涂片、支气管洗液及拭擦物涂片，口腔食道涂片、胃液冲洗物涂片、尿液涂片、腹腔及胸腔渗出抽取液涂片等。脱落细胞临床染色一般传统的方法为巴氏染色或Hematoxylin-Eosin 染色。本染色液可作为快检染色使用，其具有染色时间短，形态清晰等特点，其染色结果可当作临床一个参考指标。
②细胞检测之标本要能获得有价值的诊断，标本中的细胞一定要尽量保持近于自然状态，避免引起细胞变性。为达到此目的，欲获得良好标本的第一步骤乃是迅速而适当的固定，如此可防止细胞变形或变性，保证染色效果的良好。

2、试剂贮存时，尽量避免高、低温环境及阳光直射。

3、冬季室温过低时，染色时间要适当延长。