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细胞培养实验中对支原体污染的预防措施

2023-06-02 11:03 来源:上海远慕生物试剂
细胞培养实验室发生支原体污染的风险较高。支原体天然存在于周围空气(气溶胶形式)、人的体表(携带和隐藏)以及未彻底消毒的器物表面,而细胞培养基中由于含有血清,营养丰富,很容易导致支原体的快速繁殖。

支原体的污染肉眼不易察觉,直到严重的阶段才会出现培养基变色、细胞异常等情况。支原体可造成细胞代谢改变,基因表达谱发生变化,从而严重干扰实验进程。因此,在细胞培养过程中,定期监测是否存在支原体污染,及时预防支原体污染是每个科研人员的工作之一。
为防止支原体污染细胞,可采取以下措施:

1、保持无菌技术:始终在无菌环境中工作,使用适当的个人防护设备,例如手套和实验室外套,定期对实验室进行清洁,可以使用支原体祛除试剂:Mycoplasma-off,无需配制,即喷即用;Water Shield可用于水槽、水浴锅等处的支原体祛除和预防。保持良好的实验室卫生:保持实验室清洁和维护良好,包括设备和表面。

2、使用无支原体细胞系:建议从信誉良好的供应商提供的无支原体细胞系开始。

3、定期检测支原体:定期检测细胞培养物是否存在支原体污染至关重要。可以使用各种测试,包括基于 PCR 的方法、荧光染色和 ELISA。

4、避免交叉污染:保持细胞培养分离,避免交叉污染。正确标记和处理细胞系。

通过采取这些措施,可以降低支原体污染的风险,并保持基于细胞的实验的完整性和可靠性。
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