提高质粒DNA的转化效率的方法

1.细胞生长状态和密度:

不要用经过多次转接或储于4℃的培养菌，最好从-70℃或-20℃甘油保存的菌种中直接转接用于制备感受态细胞的菌液。细胞生长密度以刚进入对数生长期时为好，可通过监测培养液的OD600来控制。DH5α菌株的OD600为0.5时,细胞密度在5×107个/ml左右(不同的菌株情况有所不同),这时比较合适。密度过高或不足均会影响转化效率。

2.质粒的质量和浓度:

用于转化的质粒DNA应主要是超螺旋态DNA(cccDNA)。转化效率与外源DNA的浓度在一定范围内成正比,但当加入的外源DNA的量过多或体积过大时,转化效率就会降低。1ng的cccDNA即可使50μl的感受态细胞达到饱和。一般情况下,DNA溶液的体积不应超过感受态细胞体积的5%。细胞周期,细胞周期蛋白,检测步骤方法,结果分析,细胞周期调控点,细胞周期的调控机制,细周期蛋白激酶,间期分裂期,时间,细胞周期试剂盒。 常用的质粒载体

载体种类：质粒、噬菌体、腺病毒载体、逆转录病毒载体

质粒特点：
存在于细菌染色体外的小型环状DNA分子。
具有自我复制功能。
带有抗性基因及表型识别等遗传性标记物。
经改造后具有多克隆位点。
举例：pMD-18T质粒、pUCl9质粒、pBR322质粒等