免疫荧光染色的染料需具备的条件

用于免疫荧光染色的染料需具备以下几个条件：

荧光染料应有较高的量子产额和消光系数；

荧光染料对488nm的激发光波长有较强的吸收；

发射光波长与激发光波长之间应有较大的波长差；

容易与被标记的单克隆抗体结合而不影响抗体自身的特异性。

1.异硫氰酸荧光素（FITC）：可产生亮绿色荧光。FITC是免疫荧光标记最常用的荧光探针。

2.德州红：与生物素偶联的抗体有很强的亲和力，产生红色荧光。

3.藻胆蛋白类：主要包括藻红蛋白（PE）、藻青蛋白（PC）、别藻青蛋白（APC）三类。多发生橙色至红色荧光。

4.能量传递复合染料 免疫荧光用什么封闭比较好？

可以使用无蛋白封闭液 PW040 PW041 PW042，

血清封闭：组织切片上有剩余的位点可以与一抗非特异性结合，造成后续结果的假阳性；封闭血清一般是和二抗同一来源的，血清中动物自身的抗体，预先能和组织中有交叉反应的位点发生结合；也可以用小牛血清、BSA、羊血清等，但不能与一抗来源一致。