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软骨染色液(阿利新蓝法,pH1.0)操作步骤

2022-03-03 13:29 来源:上海远慕生物试剂

产品简介:
阿利新蓝(Alcian)又称爱先蓝或阿尔辛蓝等,是一种类铜钛花青共轭染料,最初用于纺织纤维染色。这种阳离子染料与酸性基团结合,也即阿尔辛蓝与组织内含有的阴离子基团如
羧基和硫酸根形成不溶性复合物。阿利新蓝由中央含铜的酞菁环与四个异硫脲基通过硫醚键相连而成,该异硫脲基呈中度碱性,使阿利新蓝带阳离子。pH 值为 2.5 时,组织内的羧基电离,带有一个负电荷,与阿利新蓝中的阳离子形成盐键,使带有羧基的酸性黏液物质(硫酸黏蛋白和唾液黏蛋白)染色。pH 值为 1.0 时,组织内的硫酸根电离,带有一个负电荷,与阿利新蓝中的阳离子形成盐键,使带有硫酸根的组织(如硫酸黏液物质)染色。
软骨染色液(阿利新蓝法,pH1.0)利用染液的不同 pH 值可区分粘液物质的类属,pH 为 1 时,羧基(COOH)不着色,硫酸基(OSO3H)着色,pH 为 2.5 时,羧基染色良好而硫酸粘液着色不佳,使硫酸黏蛋白和唾液黏蛋白着色。本试剂仅适用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。

产品组成:
试剂(A): Alcian 酸化液 50ml RT
试剂(B): Alcian 染色液(pH1.0) 50ml 4℃ 避光

 
 

 
自备材料:1、 系列乙醇 2、 蒸馏水

操作步骤(仅供参考)
1、常规脱钙,二甲苯脱蜡,通过梯度乙醇后,入蒸馏水再水化。
2、入 Alcian 酸化液浸泡 3min。
3、入 Alcian 染色液染色 30min。
4、 流水冲洗 5min.
5、梯度乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封片。

 染色结果:
硫酸黏液物质(羧基) 蓝色
细胞核 淡蓝色

 
 
注意事项:
1、 固定液采用 10%中性福尔马林。
2、该法可区分鉴别硫酸黏蛋白和蛋白多糖,其 pH=1.0。
3、已开封试剂应在开封后 6 个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期: 12 个月有效。
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