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比色皿用不对,后果很严重!

2022-01-17 9:57 来源:上海远慕生物试剂
光谱分析中,常用到比色皿进行定量和定性分析。一旦比色皿选择、使用、清洗不当,便可能造成实验误差等不良后果。

比色皿分类
比色皿,又名吸收池、样品池,用于盛放参比液、样品液。配套在光谱分析仪器上,如分光光度计,血线蛋白分析仪,粒度分析仪等。
比色皿按使用的波长范围可分为三大系列:可见光系列(称:玻璃比色皿);紫外可见光系列(称:石英比色皿);红外光系列(称:红外比色皿)。

比色皿选择
玻璃比色皿只能用于可见光区,适用于330~1000nm 波长范围。
石英比色皿既适用于紫外光区,也可用于可见光区,适用于200~400nm波长范围。
由于玻璃比色皿的价格远远低于石英比色皿,通常选择可见光区使用玻璃比色皿,紫外光区使用石英比色皿。

比色皿使用
在使用比色皿时,两个透光面要完全平行,并垂直置于比色皿架中,以保证在测量时,入射光垂直于透光面,避免光的反射损失,保证光程固定。
比色皿一般为长方体,其底及两侧为磨毛玻璃,另两面为光学玻璃制成的透光面采用熔融一体、玻璃粉高温烧结和胶粘合而成。所以使用时应注意以下几点:
◇ 拿取比色皿时,只能用手指接触两侧的毛玻璃,避免接触光学面,用力不可过大。同时注意轻拿轻放,防止破损。
◇ 比色皿中不应长期盛放含有腐蚀玻璃物质的溶液。
◇ 比色皿高温后易爆裂,因此不应放在火焰或电炉上加热或干燥箱内烘烤。
◇ 比色皿的透光面不应与硬物或脏物接触。比色皿使用时请勿碰撞。
◇ 盛装溶液时,高度应为比色皿的2 /3 处,光学面如有残液可先用滤纸轻轻吸附,然后再用镜头纸或丝绸顺着同一方向擦拭。
◇ 在测量时如对比色皿有怀疑,可自行检测。可将波长选择在实际使用的波长上,将一套比色皿都注入蒸馏水,将其中一只的透射比调至95%(数显仪器调至100%)处,测量其它各只的透射比,凡透射比之差不大于0.5%即可配套使用。

比色皿误差规避
①比色皿的透光面不应与硬物或脏物接触,比色皿使用时勿碰撞。
②比色皿中的液体,应沿毛面倾斜,慢慢倒掉,不要将比色皿翻转,直接口向下放在干净的滤纸上吸干剩余液,然后用蒸馏水冲洗比色皿内部倒掉(操作同上)避免液体外流,使第2次测量时不用擦拭比色皿,不致因擦拭带来的误差。
③比色前将各个比色皿中装入蒸馏水,在比色波长下进行比较,误差在±0.001吸光度以内的比色皿选出4-8个进行比色测定,可避免因比色皿差异造成测量误差。
④用完即清洗,清洗后在通风阴凉处干燥,等彻底干燥后放入相应装具中。放置时,装具保持清洁干燥,比色皿应秉承“光面朝上,毛面在两侧”的原则,这样便于抓取两毛面拿出使用,不易弄污光面。

比色皿清洗
分光光度法中比色皿洁净与否是影响测定准确度的因素之一。因此,比色皿必须保持清洁和无伤痕,选择正确的洗净方法。
清洗液
比色皿清洗液:
浓盐酸:甲醇:水=1:4:3
如果比色皿被有机物污染,宜用盐酸—乙醇(1:2)混合液浸洗,也可用相应的有机溶剂如醇醚混合物浸泡洗涤。如:油脂污染可用石油醚浸洗,铬天青显色剂污染可用硝酸(1:2)浸洗等。
也可用冷的或温热的(40~50℃)阴离子表面活性剂的碳酸钠溶液(2%)浸泡,可加热10分钟左右。对于有色物质的污染可用HCL(3mol/L)-乙醇(1+1)溶液洗涤。
有色物质污染的比色皿用盐酸:乙醇(1:2)浸泡一段时间,颜色就去掉了。

清洗步骤
① 比色皿用完后应当先用适当溶剂冲洗,注意里外都要洗到。如果溶剂无毒的话,可以装入一半溶剂后,用手指按住比色皿的两端,用力摇晃,次数应当是不少于三次。
② 然后用大量的自来水冲洗,这一步对水溶液和盐溶液非常重要。当然如果所用溶剂不亲水这步可以放弃。
③ 最后再用去离子水清洗,注意里外都要洗到,如果溶剂不亲水的这一步也可放弃。
④ 洗完后不要刻意的将比色皿擦干,需放在比色皿盒内,不用盖上让其自然挥干。
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