包涵体分离缓冲液实验步骤
2021-12-10 13:39 作者:洛辰 来源:上海远慕生物试剂
中文名称: 包涵体分离缓冲液
分 类:表达纯化
规 格:500ml
保存条件:室温,12个月
用 途:又蛋白质分离,分离包涵体
简介:
包涵体是采用分子生物学技术导入的外源基因在细菌中获得外源蛋白的高表达,使很多蛋白质产物在细菌内聚集为没有活性的固体颗粒。
包涵体分离缓冲液主要由TritonX-100等组成,裂解细胞后,采用分离缓冲液进行分离,有利于提纯包涵体,为下游实验作准备。
操作步骤(仅供参考):
1、12000g 4℃离心细胞裂解液。
2、弃上清,沉淀混悬于9倍体积的包涵体分离缓冲液中,室温孵育。
3、4℃离心,沉淀用工作缓冲液(主要由脲、谷胱甘肽等组成)混悬,室温孵育。
4、复性。