冻存细胞时，还在坚持缓冻原则吗？

一、我们先来说说何为缓冻：

缓冻即为冻存细胞时，要程序降温——4℃ 30min，-20℃ 1h ，-80℃ 过夜，次日投入液氮内。

二、那为什么要进行缓冻呢？

其实所谓的缓冻是一般使用传统冻存液冻存过程中需要程序降温。

传统的冻存液，一般由胎牛血清、DMSO及基础培养基等组分组成。冻存保护的DMSO组分，在进入细胞后结合细胞内部的水份，降低冰点，防止细胞在冷冻过程中形成冰晶对细胞造成损害。

但是DMSO只能在细胞内部保护细胞，细胞外部没有保护，水结冰晶会在细胞膜外部受到损伤，为了防止冰晶过大，使用时必须采用程序降温的方式，才可保证细胞复苏的成功率（80%以上）。

若不采用程序降温的形式，有些冻存的细胞，甚至复苏成功率为0。

三、无血清细胞冻存液帮您轻松冻细胞！

无血清细胞冻存液，为多种保护剂组合，在细胞内外进行双重保护，大大提高了细胞复苏存活率。无血清细胞冻存液，含多种保护剂成分。

一些保护剂，易于穿透细胞，避免细胞内部水分子形成冰晶损伤细胞，同时另一些保护剂不能穿透细胞，但可以在冰晶形成之前，优先结合细胞外的水分子，降低细胞外溶液的电解质浓度，减少阳离子进入细胞的数量，远慕无血清细胞冻存液，为多种保护剂组合，在细胞内外进行双重保护，大大提高了细胞复苏存活率。