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冻存细胞时,还在坚持缓冻原则吗?

2021-10-14 10:52 作者:洛辰 来源:上海远慕生物试剂
一、我们先来说说何为缓冻:

缓冻即为冻存细胞时,要程序降温——4℃ 30min,-20℃ 1h ,-80℃ 过夜,次日投入液氮内。

二、那为什么要进行缓冻呢?

其实所谓的缓冻是一般使用传统冻存液冻存过程中需要程序降温。

传统的冻存液,一般由胎牛血清、DMSO及基础培养基等组分组成。冻存保护的DMSO组分,在进入细胞后结合细胞内部的水份,降低冰点,防止细胞在冷冻过程中形成冰晶对细胞造成损害。

但是DMSO只能在细胞内部保护细胞,细胞外部没有保护,水结冰晶会在细胞膜外部受到损伤,为了防止冰晶过大,使用时必须采用程序降温的方式,才可保证细胞复苏的成功率(80%以上)。

若不采用程序降温的形式,有些冻存的细胞,甚至复苏成功率为0。

三、无血清细胞冻存液帮您轻松冻细胞!

无血清细胞冻存液,为多种保护剂组合,在细胞内外进行双重保护,大大提高了细胞复苏存活率。无血清细胞冻存液,含多种保护剂成分。

一些保护剂,易于穿透细胞,避免细胞内部水分子形成冰晶损伤细胞,同时另一些保护剂不能穿透细胞,但可以在冰晶形成之前,优先结合细胞外的水分子,降低细胞外溶液的电解质浓度,减少阳离子进入细胞的数量,远慕无血清细胞冻存液,为多种保护剂组合,在细胞内外进行双重保护,大大提高了细胞复苏存活率。
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