布氏杆菌染色液实验步骤

中文名称：布氏杆菌染色液
规格：2×50ml/2×100ml
保存条件：室温,避光,12个月
用 途：布氏杆菌染色,又称为科兹洛夫斯基染色或柯兹洛夫斯基染色。
注意事项：染色结果为：布氏杆菌呈球杆状,淡红色,其他呈绿色。

产品简介：
布氏杆菌(Brucella)是一种革兰氏阴性的不运动细菌，牛、羊、猪等动物最易感染。布氏杆菌染色又称科兹洛夫斯基染色戒柯兹洛夫斯基染色。布氏杆菌染色液采用沙黄为染色剂，临床标本直接涂片，背景干净，胞核胞质对比强烈，胞内吞噬体清晰易辨认，细菌染色特征典型。所有操作应置于二级生物安全柜中进行，一旦发现绿色细菌中有红色点状细菌，应高度怀疑为布氏杆菌，及时通知CDC，防止疫情扩散。

自备材料：
1、接种环或挑取细菌的其他工具。
2、酒精灯
3、载玻片
4、光学显微镜

操作步骤(仅供参考)：
1、涂片：取待检细菌，于载玻片中央涂成薄层，尽量薄。如果需做对照，可以将大肠杆菌与待检细菌混合涂片。
2、干燥：涂片后在室温下自然干燥，也可在酒精灯上略加温，使之迅速干燥。
3、固定：手持载玻片一端，标本面朝上，在酒精灯的火焰外侧快速来回移动3~5次，每次1s，温度不宜过高，防止菌体蛋白变性，放置待凉后染色。
4、染色：滴加沙黄染色液染色，在酒精灯的火焰上微微加热至出现蒸汽为止，通常需要30~60s。
5、清水洗去染色液。
6、复染：滴加复染液染色2~3min。
7、水洗，吸干。
8、镜检。

染色结果：
布氏杆菌  红色
大肠杆菌或其他菌  绿色

注意事项：
1、涂片之前应事先在背面做好圆圈标记，以便判断后续试验的位置。
2、取细菌时，应注意自我防护，拔或塞试管塞时，应将试管口通过火焰略加烧灼，最后将接种环在火焰上烧灼灭菌，
3、加热固定涂片时，应注意玱片勿太靠近火焰，一般要求玱片温度不超过60度，以玱片背面触及手背皮肤不觉过烫为宜。
4、待检细菌培养时间也会影响染色，阳性菌培养时间过长戒已死亡戒细菌溶解，都常呈阴性反应。