偶氮荧光桃红染色液实验步骤

中文名称: 偶氮荧光桃红染色液
规格：50ml
分类：结缔染色
储存方式：4℃,避光,12个月
用途：肌纤维染色,可区分肌纤维和胶原纤维
注意事项：肌纤维和肌上皮细胞呈玫瑰红色,胶原纤维呈黄色。

简介：肌纤维(Musclefiber)属于肌组织成分，由肌细胞组成。根据形态和功能特点，肌纤维可以分为平滑肌(又称横纹肌)、骨骼肌、心肌。肌纤维染色的方法有很多种，如丽春红法、苯胺蓝法、钨磷钨酸苏木素法等。鞣酸-偶氮荧光桃红法是利用两种酸性染料先后作用而完成鉴别染色。肌纤维染色液(Puchtler鞣酸偶氮荧光桃红法)其染色原理在于鞣酸容易进入渗透性强的胶原纤维，胶原纤维呈黄色；偶氮荧光桃红容易进入渗透性较低的肌纤维，肌纤维呈红色。偶氮荧光桃红染色液用于区分肌纤维和胶原纤维，对比清晰，不宜褪色，同时可以显示肌上皮细胞，可用于乳腺和皮肤等肌上皮细胞瘤的诊断。

操作步骤(仅供参考)：
1、常规组织固定于Bouin固定液(Carnoy固定液或中性福尔马林亦可)。
2、直接转入95%的乙醇中，常规脱水包埋。
3、石蜡切片厚4μm，常规脱蜡至水。
4、流水冲洗1min。
5、磷钼酸分化液处理。
6、入偶氮荧光桃红染色液浸染。
7、酸性醇分化液分化。
8、无水乙醇反复脱水多次。
9、常规脱水透明，中性树胶封固。

注意事项：
1）在实验后，请注意回收稀释的抗体，回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。
2）稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，4℃保存，回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。
3）如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。
4）如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。