黏蛋白染色液(温和甲基化法)说明书

中文名称：黏蛋白染色液(温和甲基化法)
产品规格：2×50mL
用途：区分黏蛋白中酸性基团：羧基和硫酸根
注意事项：酸性甲醇与阿利新蓝联合使用，碳水化合物含有羧基呈阴性，出现任何着色则意味着含有硫酸根。
储存条件：4℃，避光，12个月

产品说明：黏蛋白染色液(温和甲基化法)属于化学修饰和阻断法的一种，其原理是利用酸性醇溶液消除COOH的嗜碱性。
Alcian染色液pH值为2.5时，组织内的羧基电离，带有一个负电荷，与阿利新蓝中的阳离子形成盐键，使带有羧基的组织(如蛋白多糖/透明质酸以及上皮酸性黏蛋白)染色，主要用于鉴别黏蛋白中的酸性基团。

自备材料：系列乙醇、恒温箱、蒸馏水、去离子水

操作步骤(仅供参考)：
1.两张阳性对照片和两张实验切片均脱蜡至水。
2.将一张阳性对照片和一张实验片入酸性醇溶液，37℃孵育4h。另外的一张阳性对照片和一张实验片仅用去离子水37℃孵育4h。
3.流水冲洗5min。
4.Alcian染色液染色15-30min。
5.流水冲洗。
6.梯度乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。


染色结果：
未处理的硫酸黏蛋白、硫酸蛋白多糖、唾液粘蛋白、透明质酸   蓝色
处理后的切片    淡蓝色
注：处理后的残存的任何颜色都是由于存在硫酸黏蛋白和(或)硫酸蛋白多糖。


注意事项：
1.处理时间超过4h有可能导致硫酸根水解。
2.需要阳性对照片以便验证甲基化程序的有效性。
3.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操