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糖原PAS染色液(细胞专用)说明书

2021-05-20 14:02 作者:洛辰 来源:上海远慕生物试剂
中文名称:糖原PAS染色液(细胞专用)
产品规格:5×20mL|5×50mL
保存:4℃避光,12个月
分类:碳水染色
用途:经典的糖原染色法,不仅能够显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质,特别适用于细胞、极其薄的切片。
注意事项:细胞的糖原染色中推荐采用该染色液,是经典糖原染色法,高碘酸和schiff试剂应低温保存。染色结果为:PAS反应阳性物质(糖原或多糖)均呈红色或紫红色;细胞核呈蓝色。

简介:糖原染色是病理学中常规的染色方法之一,McManus在1946年蕞先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白,该法常用来显示糖原和其他多糖,该技术不仅能显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质以及软骨、垂体、霉菌、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。氧化剂能氧化糖类及有关物质中的1,2-乙二醇基,使之变为二醛,醛与Schiff试剂能结合成一种品红化合物,产生紫红色。由于氧化剂还可氧化细胞内其他物质,使用时应注意选择好氧化剂的浓度和氧化时间,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于过氧化,这是很关键的步骤。

糖原PAS染色液(细胞专用)大大增强了染色效果;性能稳定,特异性强;操作简捷,仅需1h;氧化剂、苏木素浓度更低,geng适用于细胞、超薄组织切片染色;无盐酸乙醇分化步骤。该试剂盒仅适用于科研领域。


操作步骤(仅供参考):
1、细胞、骨髓涂片用PAS固定液固定10~15min。
2、水洗、晾干。
3、入氧化剂,室温氧化15-20min。
4、自来水冲洗2次,蒸馏水浸洗2次。
5、入SchiffReagent并加盖,置于室温阴暗处浸染10~20min。
6、亚硫酸钠溶液滴洗2次,每次2min。该步骤亦可省略。
7、流水冲洗2min。
8、入Mayer苏木素染色液,复染1~2min。水洗、晾干、镜检。

染色结果:
PAS反应阳性物质(糖原或多糖)    红色或紫红色
细胞核                        蓝色
细胞质                        深浅不一的红色
备注:颜色深浅很大程度上取决于样品在氧化剂和SchiffReagent中作用时间的长短。

阴性对照(可选):
1、取淀粉酶1g溶解于PBS(pH5.3)100ml,处理30~60min,与其他样本共同入氧化剂。结果应为阴性。
2、(备选方案)取唾液片(过滤后用)处理30~60min,与其他样本共同入氧化剂。结果应为阴性。
3、(备选方案)如果对照片采用其自身样本,对照片不经氧化剂这一步,直接入SchiffReagent。结果应为阴性。

注意事项:
1、氧化剂氧化时间不宜过久,氧化时的温度以18~22℃蕞佳。
2、过碘酸溶液、SchiffReagent使用时避免接触过多的阳光和空气,使用前蕞好提前30min取出恢复至室温,避光暗处使用。
3、过碘酸溶液和SchiffReagent中作用时间非常重要,该依据切片厚薄、细胞或组织的类别等决定。
4、如常规切片建议用糖原PAS染色液,因为其过碘酸溶液和苏木素溶液浓度都相对高。
5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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