哺乳动物稳定细胞株筛选常见问题

哺乳动物稳定细胞株筛选常见问题

1、为什么要构建稳定细胞株
答：对于少量、临时的实验，瞬时转染是完全符合需求的，但是如果试验中需要长期大量的使用某种细胞，我们就需要构建稳定细胞株，构建稳定细胞株的好处在于
1、可以减少不同批次实验中转染效率差异带来的实验结果差异，提高实验的可重复性。
2、构建好细胞系后不必再进行瞬时转染实验以及反复制备质粒，减少工作量。
3、不再使用价格高昂的转染试剂，节约实验成本。

2、所有的细胞株都可以构建稳定细胞系吗？
答：不是所有的细胞株都能构建成为稳定细胞系的。构建稳定细胞系需要满足2个条件：
1、细胞能稳定传代；
2、细胞的转染效率满足要求。远慕生物主要是为科研及工业用户构建过表达细胞株，采用的主要是CHO细胞和293细胞。

3、构建好的稳定细胞系如何培养和保存？
答：我们提供的单克隆和多克隆细胞系培养和保存均与原来的细胞株无异，无需抗生素维持。

4、单克隆和多克隆细胞株的区别是什么？
答：单克隆细胞是转染目的基因后经过克隆筛选得到的，由一个细胞扩增形成的细胞株，目的基因整合的位置和拷贝数都是一致的，可以长期维持表达量不变。多克隆细胞是转染目的基因后直接经抗药基因筛选得到的。是多种阳性细胞克隆的混合。在长期的培养过程中产量由可能会发生变化。