甲苯胺蓝-DNA琼脂使用方法

产品名称：甲苯胺蓝-DNA琼脂
英文名称：Toluidine Blue-DNA Agar
规格:250g
有效期：三年
用途：甲苯胺蓝-DNA琼脂用于金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶的试验。
贮 存： 甲苯胺蓝-DNA琼脂于2～8℃避光贮存

原 理：
具有脱氧核糖核酸酶的细菌分解培养基中的脱氧核糖核酸(DNA)，使DNA长链水解成数个单核苷酸的寡核苷酸短链，使指示剂甲苯胺蓝作用变成粉红色;氯化钙提供阳离子作为激活剂;氯化钠维持均衡的渗透压;三羟甲基氨基甲烷为缓冲剂;琼脂为培养基的凝固剂。

配方(每升)：
脱氧核糖核酸(DNA)  0.3g
氯化钙  0.0011g
氯化钠  10g
甲苯胺蓝  0.083g
三羟甲基氨基甲烷  6.1g
琼脂   10g
蕞终pH  9.0±0.2
    
使用方法：
1. 称取 甲苯胺蓝-DNA琼脂26.5g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，115℃高压灭菌15min(即用可不需灭菌)，备用。
2. 载玻片的制备：取3mL甲苯胺蓝-DNA琼脂平铺于在载波片上制成标本，待琼脂凝固后，在琼脂上打成直径2mm的小洞(每个载玻片10-12个)，抽出小洞中的琼脂块。
3.从Baird-parker平板挑一个可疑单菌落接种普通肉汤培养基中，36±1℃培养20h～24h后，经过100℃沸水煮15min,取0.01mL接种所制备的载玻片上小洞，于35℃培养4h后，观察结果。

质量控制：
质控菌株接种后，于35℃培养4h结果如下：按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置36±1℃需氧培养24±2小时。