罗丹明123溶液(0.5mg/ml)实验步骤

中文名称：罗丹明123溶液(0.5mg/ml)
产品规格：100ul
用途：线粒体膜电位检测
注意事项：主要由罗丹明123、PBS组成，采用FACS检测，激发波长511nm，发射波长535nm。
储存条件：4℃，避光，12个月

Rhodamine 123是一种可以通过细胞膜的选择性染色活细胞线粒体的荧光染料，呈黄绿色荧光。广泛用作检测线粒体膜电位，也常用于细胞凋亡检测。它可以快速通过细胞膜，仅需几分钟就可以被具有活性的线粒体所俘获，并且对细胞没有任何毒性。

Rh123用于对许多种细胞进行染色，包括植物细胞和细菌。由于细胞内ATP的量与Rh123的荧光强度之间有相关性，因此Rh123被应用于检测细胞内的ATP。


染色程序：
（1） 将0.4mgRh123溶解到1mL DMSO中制备成1mMRh123-DMSO溶液。
（2） 用载玻片准备细胞。细胞数目应为5×104~5×105个/mL。
（3） 孵育该载玻片，用PBS或Hank's液洗涤细胞。
（4） 用培养基稀释1mM Rh123溶液以制备1~20µM Rh123缓冲液。
（5） 将Rh123缓冲液加入载玻片并在37℃下孵育30分钟至1小时。
（6） 去除Rh123缓冲液并用培养基洗涤细胞（洗涤细胞后为了固定，加入10%福尔马林缓冲液并孵育15~20分钟，接着用PBS洗涤）。
（7） 用带有荧光素滤光片的荧光显微镜观察细胞。