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常用细菌培养基制备及注意事项

2021-04-08 10:39 作者:洛辰 来源:上海远慕生物试剂

实验方法原理 培养基是人工合成的一种混合营养料,用于分离培养细菌。常用的有基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基等。

试剂、试剂盒

牛肉/膏 蛋白胨 氯化钠 蒸馏水 琼脂 NaOH 酚红指示剂

仪器、耗材

pH 试纸 三角烧瓶 量筒 天平 吸管

实验步骤

1.  称取牛肉/膏3 g,蛋白胨10 g,氯化钠5 g 加入1 000 ml 蒸馏水中,加热溶化。

2.  待冷至40-50℃时,测定并矫正酸碱度为pH7.6。通常未矫正前的肉膏汤均呈酸性,故常用1/10 M NaOH 溶液进行矫正。

3.  酸碱度调整后,煮沸3-5 分钟,补足因蒸发失去的水量,待冷却后用滤纸使之过滤澄清。并重新测定酸碱度一次,若变动较大,应再进行矫正。

4.  按应用时的需要量分装于适当的试管或烧瓶内,塞上硅胶塞并用牛皮纸包扎,置高压蒸汽灭菌器内,经103.4 kpa、121.3℃、20 分钟灭菌。

5.  灭菌后取出培养基,待冷至40℃以下时,放入37℃温箱24 小时做无菌试验,如无菌生长,即可备用。

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