MS培养基配方及其特点

植物组织培养概念（广义）又叫离体培养，指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。

植物组织培养概念（狭义）指用植物各部分组织，如形成层、薄壁组织、叶肉组织、胚乳等进行培养获得再生植株，也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养，愈伤组织再经过再分化形成再生植物。

MS培养基（Murashige and Skoog medium）是植物组织培养中最常见的培养基。很多植物的细胞、组织和器官在MS培养基上表现良好的生长和发育。1/2MS培养基，即MS培养基无机盐浓度减半，也被广泛采用。
1962年7月，Toshio Murashige 和Folke Skoog在 Physiologia Plantarum杂志发表了标题为A Revised Medium for Rapid Growth and Bio Assays with Tobacco Tissue Cultures的研究论文，其中提出了MS培养基的配方。

MS培养基渊源

Toshio Murashige作为Folke Skoog教授的博士生以烟草髓质（pith）和愈伤组织培养体系来寻找新的植物激素（organic growth factors）。Toshio Murashige在White培养基的基础上，研究了氮磷钾等十几种元素在不同浓度下对烟草愈伤组织生长量的影响，通过绘制元素浓度——生物量曲线找到了上述元素的最大适宜浓度。

这些实验发现，提升氮和钾的浓度对烟草愈伤组织生物量的增加最为有效。

MS培养基最大的特点是无机盐的浓度特别高，在常见的植物培养基中是最高的。

MS培养基中的氮元素含量特别高，达到了B5培养基的2.3倍，WPM培养基的4.8倍和White培养基的30倍。这也是有些植物的组织在MS培养基上生长发育受阻的原因，通常可以通过降低浓度来得到改善。

与生长良好的植物的平均元素组成相比，MS培养基中氮和钾元素是足够的，而磷、钙和镁的含量明显较低。

每种植物的元素组成都有其特点，根据这些特点调整培养基的配方可以提升离体培养的效果。

培养基的配制

配制培养基有两种方法可以选择，一是购买培养基中所有化学药品，按照需要自己配制；二是购买商品的混合好的培养基基本成分粉剂，如MS、B5等。自己配制可以节约费用，但浪费时间、人力、且有时由于药品的质量问题，给实验带来麻烦。就目前国内的情况看，大部分还是自己配制。

1、配制几种母液

一般配制成100倍MS有机母液。配成1L母液，倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。

1.1配制MS大量元素母液

1.2配制MS微量元素母液

1.3配制MS有机母液

1.4配制MS铁盐母液

MS母液有5种大量元素母液，加上MS微量元素母液、MS有机母液和MS铁盐母液，共8种母液。

2、激素母液的配制

各种生长素和细胞分裂素要单独配制，不能混合在一起，生长素类一般要先用少量95%的酒精或1当量的NaOH溶解，细胞分裂素一般要先用1当量的盐酸溶解，然后再加蒸馏水定容。一般取100mg配成100ml母液。

3、配制培养基

以配置1L MS培养基为例，按顺序进行如下操作：

3.1先在烧杯中放入一些蒸馏水。

3.2分别取上面八种母液10ml倒入。

3.3一般称取30g蔗糖倒入，搅拌溶解。

3.4加蒸馏水用量筒定溶至1L。

3.5按设计好的方案添加各种激素，由于激素的用量很小，而且激素对组培植物的生长至关重要。所以有条件的话最好用微量可调移液器吸取，减少误差。

3.6用精密试纸或酸度计调整PH至5.7～5.8。（有条件的话使用酸度计，比较精确） 可配1当量的HCL和1当量的NaOH用来调溶液PH值。

1当量HCL配制：用量筒量取8.3ml配成100ml溶液。

1当量NaOH配制：称取NaOH 4g 配成100ml溶液。

3.7称取5g左右琼脂粉（质量好的琼脂粉),倒入上面配好的溶液中，放在电炉上加热至沸腾，直到琼脂粉熔化。

3.8稍微冷却后，分装入培养容器中。无盖的培养容器要用封口膜或牛皮纸封口，用橡皮筋或绳子扎紧。

3.9放入消毒灭菌锅灭菌，灭菌20分钟左右。

3.10灭菌后从灭菌锅中取出培养基，平放在实验台上令其冷却凝固。