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铁在细胞培养中起一个什么作用?

2020-10-21 10:50 来源:上海远慕生物试剂
铁对体外的细胞培养非常重要,它作为一些酶的辅因子,参与了细胞的多种生理功能,其中至少有如下三个重要方面:

1. 参与细胞的呼吸代谢

线粒体是细胞氧化代谢的部位和能量中枢,其中,线粒体膜上的琥珀酸脱氢酶扮演着关键角色。铁即是琥珀酸脱氢酶的一部分,参与细胞的氧化代谢和能量生成。

2. 保护细胞不受氧化损伤

铁作为铁卟啉结构的核心,是过氧化氢酶和过氧化物酶等酶的关键组成部分,能消除过氧化氢和酚类、胺类、醛类的毒性,使细胞免于遭受H2O2等过氧化物带来的损伤,为细胞提供抗氧化防御,使细胞更健康。

3. 提高细胞密度和存活率

铁是细胞增殖所必需的元素。如果没有铁,细胞就不能在增殖时从G1期进入到S期(2,3)。缺铁会导致细胞凋亡和死亡(4)。如果缺乏铁, 细胞复制时DNA合成将受到影响。因为铁是RNA聚合酶所必需(11),它也是核糖核苷酸还原酶的组成部分(5)。而核糖核苷酸还原酶是细胞在合成DNA过程中,将核糖核苷酸转变成脱氧核糖核苷酸的限速酶(6)。已知有药厂已开发铁配方专利,用于加入到细胞培养基中,以提高细胞密度和存活(10)。

对于无血清培养基,铁也是一种重要的补充剂。有研究显示,在无血清培养基中,铁能诱导LI 210细胞生长。并且它不依赖转铁蛋白的存在(7)。

在将铁强化小牛血清作为胎牛血清(FCS)的替代品方面,从1988年以来,已陆续有一些相关报道,如对于一些细胞系,铁强化小牛血清在促细胞生长或克隆率方面,等效或优于FCS(13)。对于牛肌源细胞,在DMEM/M199培养基中添加铁强化小牛血清,在细胞增殖速率方面,优于胎牛血清、新生牛血清和马血清(8)。在CHO细胞的HGPRT基因突变试验中(该实验常用于化学物的遗传毒性检测),在倍增时间和克隆率方面,补铁型小牛血清和FCS没有显著差异,补铁型小牛血清完全可以取代FCS,从而降低实验成本(9)。

值得指出的是,铁强化牛血清的使用效果与细胞类型和所用基础培养基关系密切。在一项细胞长期生长的比较研究中,发现铁强化小牛血清性能不如FCS,但优于小牛血清(14)。

因此,使用铁强化牛血清,可以预期,其性能必然优于普通牛血清。
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