无菌检测培养基灵敏度检测试验

研究内容：无菌检测培养基灵敏度检测试验

研究机构：国家药典委员会

刊发表时间及刊物：中国药典·三部（2015）1101

实验目的

在做无菌检测时，需对所用培养基的灵敏度进行检测，2015版药典提供了培养基灵敏度检测的试验方法：通过接种一定浓度的指定菌株至待测培养基中，在规定培养条件下进行培养，通过观察菌株的生长状况从而判断待测培养基的灵敏度。

1.对试验菌株的要求

培养基灵敏度检测试验所用菌株代次不得超过5代，菌种保藏中心的干粉制剂计为0代，后续每进行一次传代菌种代次加1。

2.菌种的制备

将用于试验的菌株接种至对应培养基进行培养，获取菌株培养物，详情如下：



将按上述要求获得的新鲜培养物制成含菌量小于100Cfu/ml的菌悬液。

3.培养基接种

按下表要求将上述菌悬液接种至相应培养基中进行培养，观察生长状况。




4.结果判定

接种后每日观察培养基内菌株生长情况，空白对照应无菌生长，其余长势良好则培养基灵敏度检测判为合格。

讨论

1.用新鲜培养物制备小于100cfu/ml的菌悬液，若用涂板的方法进行计数则计数结果之后。

2.菌悬液接种至待检培养基后的培养条件不明确只规定了时间但为规定培养温度。

3.接种后的培养观察，其中“长势良好”主观性强。