巴氏染色液(Papanicolaou EA36)说用说明书

简介:
细胞学常规染色普遍使用巴氏(Papanicolaou)法。Papanicolaou Stain 最初仅用于检测阴道上皮雌激素水平以及生殖道念珠菌、滴虫等病原体。橘黄G6与EA36或EA50联合使用，可将胞浆染成颜色鲜明的绿色、蓝色和粉色。目前大多数实验室采用成品染液，所以每种染液应注意其改良后的最佳条件。最终胞浆染色应透明可见，核染色质应很容易辨别出来。目前改良的巴氏染色液含有多种离子，具有多色性染色效能。染色后胞质鲜艳、透明性好以及核膜、核仁、染色质结构清晰。细胞核染色液主要为Harris苏木素染液，细胞质染色液主要为EA36染液、EA50染液。巴氏染色液用于细胞脱落标本，细胞核呈蓝色或黑色，角化鳞状细胞胞浆呈粉红或橘红色。
Leagene巴氏染色液(Papanicolaou EA50)细胞质染色采用EA50染色液，细胞核染色采用Leagene自主研发的无毒改良型苏木素染色液，不仅适用于妇科细胞学涂片染色如筛查宫颈癌和癌前病变，也适用于胸水、腹水、痰液等非妇科细胞样本的染色。
 
信息说明】
　　产品名称：巴氏染色液(Papanicolaou EA36)
　　供应商：远慕染色液厂家
　　规格：4×100ml/4×500ml
　　分类：细胞染色
　　储存条件：室温，避光，6个月
　　用途：细胞学样本常规染色,尤其适用于妇科细胞学涂片染色、细胞脱落标本染色。
　　注意事项：巴氏染色液是用苏木素、橙黄、伊红、磷钨酸、亮绿等配制而成；用于处理分泌物等细胞脱落标本,细胞核呈蓝色或黑色,角化鳞状细胞胞浆呈粉红或橘红色。
 
　　【简介说明】
　　细胞核染色液主要为Harris苏木素染液，细胞质染色液主要为EA36染液、EA50染液；巴氏染色液用于细胞脱落标本，细胞核呈蓝色或黑色，角化鳞状细胞浆呈粉红或橘红色。
　　细胞学常规染色普遍使用巴氏(Papanicolaou)法；Papanicolaou Stain最初仅用于检测阴道上皮雌激素水平以及生殖道念珠菌、滴虫等病原体。
　　目前大多数实验采用成品染液，所以每种染液应注意其改良后的最佳条件；最终胞浆染色应透明可见，核染色质应很容易辨别出来；目前改良的巴氏染色液含有多种离子，具有多色性染色效能。
 
　　【自备材料】
　　1、固定液(如95%乙醇-冰乙酸固定液)
　　2、系列乙醇
　　3、显微镜
　　4、盐酸乙醇分化液
 
　　【染色原理】
　　巴氏染色液(Papanicolaou EA36)细胞质染色采用EA36染色液，细胞核染色采用Jimei自主研发的无毒改良型苏木素染色液，EA36比EA50更适用于妇科细胞学涂片染色筛查宫颈癌和癌前病变；染色后胞质鲜艳、透明性好以及核膜、核仁、染色质结构清晰。
 
　　【染色结果】
　　细胞核：蓝紫色或黑色
　　非角化细胞的胞质：淡蓝色或淡绿色
　　角化细胞的胞质：粉红或橘红色
 
　　【组成说明】
　　试剂(A)：Jimei苏木素染色液： 规格：4×100ml/4×500ml，保存：RT避光
　　试剂(B)：蓝化液：规格：4×100ml/4×500ml，保存：RT
　　试剂(C)：橘黄G6染色液：规格：4×100ml/4×500ml，保存：RT
　　试剂(D)：EA36染色液： 规格：4×100ml/4×500ml，保存：RT避光
　　使用说明书 ：1份
 
　　【操作流程】
　　1、细胞涂片用95%乙醇-冰乙酸固定液固定10~15min。
　　2、95%的乙醇浸泡1min。
　　3、80%的乙醇浸泡1min。
　　4、70%的乙醇浸泡1min。
　　5、蒸馏水或自来水浸泡或冲洗1min。
　　6、Jimei苏木素染液染色5~10 min。
　　7、自来水冲洗2 min。
　　8、1%的盐酸乙醇分化液分化约4~5s或0.5%盐酸水溶液分化10s。
　　9、自来水冲洗2 min。
　　10、蓝化液中蓝化2 min。
　　11、自来水冲洗2 min。
　　12、70%的乙醇脱水2min。
　　13、80%的乙醇脱水2min。
　　14、95%的乙醇(Ⅰ)、(Ⅱ)脱水各2min。
　　15、橘黄G6染液染色2min。
　　16、95%的乙醇(Ⅰ)、(Ⅱ)冲洗各2min。
　　17、EA36染色液染色3~5min。
　　18、95%的乙醇(Ⅰ)、(Ⅱ)脱水各1min。
　　19、无水乙醇(Ⅰ)、(Ⅱ)脱水各1min。
20、二甲苯透明、中性树脂封片。
 
注：
　　1. 因苏木素上有结晶下有沉淀，使用前应用滤纸过滤一遍。染色时要轻拿轻放。苏木素染液在染够1500～2000张玻片的情况下更换新的染液。苏木素的染色时间随气温和染料情况而酌情改变。
　　2. 盐酸分化的作用为分化掉胞浆上沾上的苏木素，因此时间不宜长。但如果分化不够，会造成细胞核颜色过深或（及）胞浆很难上色。.分化后立即放入自来水中冲洗。不宜久置，否则可使全部颜色消失。
　　3. 碱化亦称返蓝过程，返蓝偏短，苏木色精形成不充分，从而影响染色效果。碳酸锂每缸过500张玻片更新；温水更换德频率当更高。
　　4. 橘黄染色时间不宜过长，否则EA50不易上色。橘黄每缸过500张玻片更新。
　　5. EA50使用前要充分搅拌，染色过程中提拿、旋转染色架数词。每缸过500～800张玻片后更新。
　　6. 技术人员操作要流畅，动作干净利落，不可把上一缸德染色液带入下一缸，每缸交替时要甩干玻片上残存德液体。
　　橘黄液之前的第一缸酒精每过6架更新一瓶；橘黄液之后的第一缸每过6架更新一瓶；每过6架之后更新第一缸无水酒精，并顺次向前。
 
　　【注意事项】
　　1、所有染液均需过滤，需经常更换染液。
　　2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
　　3、请严格按照巴氏染色液(Papanicolaou EA36)说明书上的要求进行规范化操作。
 
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