欢迎来到上海远慕标准品对照品网官方网站!
021-58322859
18001933641

原代细胞培养中的6个常见错误

2019-03-05 10:27 作者:洛辰 来源:上海远慕生物试剂

当培养原代细胞时,重要的是要记住,他们不是细胞系,不能同等对待。因为ScienCell在原代细胞培养方面的广泛工作,我们非常熟悉研究人员在培养原代细胞时遇到的常见问题。这里有六个在原代细胞培养中的常见错误,以及如何纠正这些错误。

 

错误#1:一小管原代细胞在水浴中解冻一段时间

  纠正#1:原代细胞对解冻过程非常敏感,因此将小瓶置于37℃水浴中,保持并轻轻旋转直到内容物刚刚解冻是很重要的。然后应立即从水浴中取出小瓶,并转移到无菌操作台。确保您的培养瓶在解冻前已经准备就绪,以便可以立即用于接种细胞,并置于培养箱中。

 

错误#2:解冻小瓶后直接离心原代细胞

  纠正#2:我们不建议在解冻后离心细胞,因为离心程序比少量的DMSO残留更有害。记住,在恢复原代细胞后的第二天更换培养基以去除任何残留的DMSO

 

错误#3:允许原代细胞变得过于融合

  纠正#3:当生长至100%汇合时,原代细胞可以变得衰老。记住,原代细胞不是100%纯,因此重要的是尽量减少污染细胞的生长。我们建议在细胞达到90-95%融合时对原代细胞进行传代培养。

 

错误#4:传代原代细胞时过度胰蛋白酶消化

  纠正#4:当细胞传代时,使用低浓度的胰蛋白酶并在显微镜下密切监测细胞。此外,记得在胰蛋白酶消化后完全中和细胞中的胰酶,因为任何活性的胰蛋白酶都将损伤细胞。我们特别推荐专门为原代细胞配制的胰蛋白酶中和溶液(Cat0113,但也可以使用10%血清或大豆胰蛋白酶抑制剂(Cat0173)。

 

错误#5:原代细胞可以很容易地重新冻存

  纠正#5:通常我们不推荐重新冻存原代细胞,因为这可以促进细胞衰老和/或导致功能变化。原代细胞非常敏感,重新冻结可能导致细胞死亡或损伤。

 

错误6:原代细胞可以无限的增殖

  纠正#6:与细胞系不同,原代细胞具有有限的扩增能力。我们建议尽早使用原代细胞进行实验以防止遗传漂移。此外,如果你正在使用一个增值困难的细胞类型,你应该密切监测细胞形态,因为少量混杂的细胞(如成纤维细胞)可能随着时间的推移,大量生长从而成为主要细胞。

 

  在培养原代细胞时,记住这六个技术提示是非常重要的。最终,如果你认真、仔细的对待你的细胞,它们也会更好地为你的实验服务。 

 

收缩
QQ咨询
  • 标准品
  • 对照品
  • 标准品网
  • 标准品厂家
电话咨询
  • 021-58993001
  • 021-58322859
  • 021-58999013
  • 021-58999639
邮箱咨询