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细胞生长曲线的测定 这些问题你遇到过吗?

2018-12-25 10:19 来源:上海远慕生物试剂
       细胞生长曲线是测定细胞绝对生长数的常用方法,也是判定细胞活力的重要指标,是培养细胞生物学特性的基本参数之一。一般细胞传代之后,经过短暂的悬浮然后贴壁,随后度过长短不同的潜伏期,即进入大量分裂的指数生长期。在细胞达到饱和密度后,停止生长,进入平顶期,然后退化衰亡。为了准确描述整个过程中细胞数目的动态变化,典型的生长曲线可分为生长缓慢的潜伏期,斜率较大的指数生长期,呈平台状的平顶期及退化衰亡4个部分。以存活细胞数(万/mL)对培养时间(h或d)作图,即得生长曲线。
1、 问:测定细胞生长曲线的意义是什么?

答:细胞生长曲线是测定细胞绝对生长数的常用方法,也是判定细胞活力的重要指标,是培养细胞生物学特性的基本参数。因为细胞太小,无法测单个细胞的生长状态,所以测细胞群体的生长曲线。

2、 问:如何选择细胞接种数?

答:可根据细胞传代培养过程中接种数及细胞生长周期进行计算,细胞接种数因细胞的不同而不同。

3、细胞计数时为什么要用台盼蓝染色?

答:加入台盼蓝后,活细胞不着色,台盼蓝着色的细胞呈深蓝色,是不健康或已死亡的细胞,不能计数。

4、细胞生长曲线测定时为什么要做重复孔?

答:测定细胞生长曲线细胞计数时选择 3 个复孔,每孔分别计三次,取其平均值,目的是减小操作误差。

5、细胞生长曲线测定周期是几天?

答:一般是一个星期。

6、为什么绘制的细胞生长曲线没有达到平台期?

答:可能有以下原因:一是细胞接种密度过低;二是细胞培养时间过短;三是细胞生长状态不好,使其不能正常增殖。

7、为什么细胞计数天,细胞数没有增加反而减少?

答:一般细胞传代后,会有一个生长缓慢的潜伏期,细胞不增殖,而细胞会有正常的死亡,故细胞数不增加反而减少。

8、细胞生长曲线还有其他方法绘制吗?

答:当然有。我们提到*多的是直接计数的方法,除此以外还有相对计数的方法,该类方法首先要绘制标准曲线,标定细胞数和某个变量的函数关系,然后我们只需要测定每天这个变量的值便可以计算出细胞数。常用的是 MTT、CCK8 等比色的方法。

 

 

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