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MC3T3-E1 小鼠胚胎成骨细胞前体细胞说明书

2018-10-16 16:57 来源:上海远慕生物试剂
  • 细胞名称:MC3T3-E1
  • 货    号:BNCC339286
  • 生长特性:  ■ 贴壁       □悬浮       □半悬浮半贴壁
  • 细胞生长条件:
培养基 90%  RPMI-1640
血清 10%  FBS (Diagnovum )
温度 37 ℃
空气条件 5% CO2,95% AIR
冻存条件 培养基50%、血清40%、DMSO 10%
        
 
 
 
 
 
 
五、组成:
组成 规格
细胞冻存管 250 ul/1支
细胞培养与操作说明 1份
 
六、细胞接收后的操作流程与注意事项
1. 您收到细胞时,若干冰已经完全融化,请立即将细胞复苏培养,切勿再次低温冻存;若尚留有干冰,请立即将含有细胞的冻存管放入液氮中保存待用,并按指定条件贮存细胞,切不可将细胞置于高温环境。
2. 请您在接收细胞后的4周内及时做复苏培养,以确认细胞活力、状态并保种。逾期恕不受理售后问题,谢谢合作!
3. BNCC冻存细胞采用优化配比的细胞冻存液,无需离心,细胞解冻后直接将250 ul细胞悬液滴入装有8-10 ml完全培养基的细胞培养瓶/培养皿中培养。

七、贴壁细胞常规培养传代流程(请严格遵守无菌操作)
1. 吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加1~2 ml 含0.25% EDTA的胰酶进行消化(注意把握消化时间,通常控制在1~2min)。
2. 镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小时去掉胰酶,加6~8 ml 完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落、吹散。
3. 取出部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,于培养箱中培养。
4. 注意培养基PH值变化情况,定期换液,待细胞密度达到70-80%以后重复传代操作或者冻存。

八、悬浮细胞常规培养传代流程(请严格遵守无菌操作)
1. 悬浮细胞常规传代操作为半量换液,分瓶传代,即取出一半细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,于培养箱中培养;也可根据细胞密度分多瓶传代。
2. 注意培养基PH值变化情况,定期换液,待细胞密度达到70-80%时重复传代操作或者冻存。

九、半贴壁半悬浮细胞培养注意事项(请严格遵守无菌操作)
1. 若悬浮细胞较多且折光率良好,可离心收集,继续培养。
2. 若有少量细胞悬浮,也可不用收集,传代操作按常规贴壁细胞操作流程处理。
3. 若悬浮细胞较多,离心收集,原瓶中贴壁细胞按照常规规贴壁细胞操作流程进行消化、终止消化、吹打,并与之前收集的悬浮细胞混悬,分瓶培养。
 
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