蛋白质沉淀方法之有机溶剂沉淀法
2024-11-28 10:13 来源:上海远慕生物试剂
有机溶剂沉淀法多用于生物小分子、多糖及核酸产品的分离纯化
有机溶剂的沉淀机理是降低水的介电常数,导致具有表面水层的生物大分子脱水,相互聚集,最后析出。
该法优点在于:
1)分辨能力比盐析法高,即蛋白质或其它溶剂只在一个比较窄的有机溶剂浓度下沉淀;
2)沉淀不用脱盐,过滤较为容易;
3)在生化制备中应用比盐析法广泛。
但是,在常温下,有机溶剂沉淀蛋白质往往引起变性。例如酒精消毒灭菌就是如此。因此,操作要求在低温下进行。有机溶剂的选择首先是能和水混溶,使用较多的有机溶剂是乙醇、甲醇、丙酮,还有二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、乙腈和2-甲基-2,4戊二醇等。