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人T细胞生长因子-Ⅲ(TCGF-Ⅲ)ELISA试剂盒说明书

2024-01-17 11:20 来源:上海远慕生物试剂
产品名称:人T细胞生长因子-Ⅲ(TCGF-Ⅲ)Elisa试剂盒

英文名称:Human T cell growth factor Ⅲ,TCGF-Ⅲ ELISA Kit

规格:96T/48T

检测方法:酶联免疫法/酶免法(ELISA)

待测样本:血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等
用 途:用于定量检测人血清、血浆及相关液体样本中人T细胞生长因子-Ⅲ(TCGF-Ⅲ)Elisa试剂盒的含量。

保存条件:2-8℃低温保存

保质期:六个月

工作原理:试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被T细胞生长因子-ⅢTCGF-Ⅲ抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并洗涤。用底物TMB显色,TMB在化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的T细胞生长因子-ⅢTCGF-Ⅲ呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。


工作原理:试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被T细胞生长因子-ⅢTCGF-Ⅲ抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并洗涤。用底物TMB显色,TMB在化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的T细胞生长因子-ⅢTCGF-Ⅲ呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

使用方法
1、加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同) 、标准孔、待测样品孔。 在酶标包被板上标准品准确加样 50μl, 待测样品孔中先加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl(样品*终稀释度为 5 倍) 。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
2、配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
3、洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。
4、加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。
5、温育:操作同 3。
6、 洗涤:操作同 5。
7、 显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10 分钟.
8、 终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色) 。
9、测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值) 。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。

注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
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